آماده سازی یک سازه ژنی بر پایه ژنوم ویروس هپاتیت d حاوی shrna علیه هپاتیت b و بررسی کارایی آن در سلولهای آلوده

پایان نامه
چکیده

هپاتیت b یکی از شایع ترین بیماریهای کبد در جهان می‎باشد، که عامل ایجاد کننده آن عفونت با ویروس هپاتیت b (hbv) است. محدودیت‎های موجود در درمان hbv به همراه پیشرفت‎هایی که درزمینه بیولوژی مولکولی hbv اتفاق افتاده، تلاشها را برای کشف شیوه‎های جدید در مهار تکثیر hbv افزایش داده است. ژنوم بسیار فشرده و هم‎پوشان با عملکردهای مختلف باعث شده تا hbv به عنوان یک هدف مناسب برای درمان بر پایه هیبریداسیون اسید نوکلئیک از جمله rnaiقرار بگیرد. hdv به طور طبیعی فقط هپاتوسیت ها را آلوده می‎کند. بعضی از مطالعات انجام گرفته پیشنهاد می‎کنند که hdv نوترکیب می‎تواند به عنوان یک ابزار موثر برای تحویل اختصاصی رایبوزایم، sirna یا سایر rnaهایی که از لحاظ بیولوژیکی فعال هستند، عمل نموده و بافتها و یا سلولهای آلوده به hbv را هدف قرار دهد. در این پژوهش ابتدا با غربالگری 5sirna علیه ژنوم hbv ،2 sirna کارآمد جهت مهار تکثیر ویروس hbv با استفاده از روشهای الایزا و real-time pcr انتخاب شدند. در مرحله بعد، از mrna تغییر یافتهhdv ، به عنوان یک وکتور برای تحویلshrna های معادل sirnaهای انتخاب شده به سلولهای آلوده به hbvاستفاده گردید. برای این منظور ابتدا ناحیه مورد نظر در ژنوم hdv برای وارد نمودن توالی shrna انتخاب شد که در انتهای mrnas-hdag می باشد. همچنین توالی shrna در یک توالی پوشاننده از اینترون صناعی قرار داده شد تا بوسیله فرآیند splicing از انتهای mrna آزاد شود. با استفاده از روش pcr هم پوشان قطعه حاوی s-hdag/intronic shrna تولید شد و پس از کلون کردن در وکتور بیانی، اثر مهاری آن بر تکثیر hbv مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این پژوهش برای اولین بار نشان داد hdv mrna توانایی انتقال توالیintronic shrna را به سلولهای huh-7 دارد و پس از پردازش بوسیله فرآیند splicing می تواند تولید rna و پروتئین های hbv را مهار نماید. بنابراین از این شیوه می توان در تولید ژنوم نوترکیب hdv حاوی توالی shrnaعلیه ویروس hbv و همچنین سایر اختلالات کبدی استفاده کرد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

شیوع عفونت هم‌زمان هپاتیت B با هپاتیت C و هپاتیت D در استان گلستان

زمینه و هدف : عفونت هپاتیت B یکی از مهم‌ترین مشکلات بهداشتی در جهان به شمار می‌رود. این مطالعه به منظور تعیین سرولوژیک آلودگی هم‌زمان HCV و HDV در افراد آلوده به HBV (HbsAg مثبت) در استان گلستان انجام شد. روش بررسی: این مطالعه توصیفی مقطعی مبتنی بر جمعیت روی 1850 نفر در استان گلستان طی سال 1383 انجام شد. 164 نفر (9درصد) از افراد جامعه HBsAg مثبت شدند که 139 نفر از این افراد از نظر ابتلا به HDV ...

متن کامل

بررسی اثر سه ماده ضدعفونی‌کننده بر ویروس هپاتیت B

  Background and Aims: Hepatitis B is an important infection route in dentistry requiring different disinfectants to prevent its transmission. The aim of this study was to compare the effects of chemical disinfectants (FD366, ISORAPID and 5% sodium hypochlorite 2/100) to remove Hepatitis B infections from the dental surfaces.   Materials and Methods: In this experimental laboratory trial, serum...

متن کامل

بررسی اثر سه ماده ضدعفونی کننده بر ویروس هپاتیت B

بررسی اثر سه ماده ضدعفونی کننده بر ویروس هپاتیت B دکتر محمدرضا آقاصادقی1- دکتر سکینه آرامی2- دکتر معصومه حسنی‌طباطبایی3 – دکتر حجت درویش‌پورکاخکی4- دکتر محمدجواد خرازی‌فرد5- دکتر حمید سرلک61- دانشیار گروه آموزشی هپاتیت و ایدز انستیتو پاستور ایران2- استادیار گروه آموزشی دندانپزشکی ترمیمی دانشکده دندانپزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران3- دانشیار گروه آموزشی دندانپزشکی ترمیمی...

متن کامل

مطالعه تغییرات ژنوم ویروس هپاتیت b در ناحیه core و الگوی پروتئین های پلاسما در بیماری هپاتیت مزمن b

چکیده بیماری هپاتیت b شایع ترین عفونت ویروسی مزمن شناخته شده انسان و شایع ترین علت سیروز کبدی و اصلی ترین عامل کارسینوم کبد در ایران به شمار می رود. اگرچه فاکتورهای تعیین کننده پیامد عفونت با ویروس هپاتیت b (hbv) به خوبی شناخته نشده اند اما پاسخ میزبان و عوامل محیطی نقش تعیین کننده ای در روند بیماری دارند. همچنین بررسی های انجام شده در تقابل پاسخ میزبان و ویروس، نقش موتاسیون های ویروسی در پات...

15 صفحه اول

فراوانی آنتی بادی ویروس هپاتیت A در مبتلایان هپاتیت B و C در ایران

Background: Superinfection of hepatitis A in chronic hepatitis B and C may worsen the course of disease. This study attempted to study frequency of hepatitis A virus antibodies in patients with hepatitis B and hepatitis C. Materials and methods: 115 hepatitis C and 56 hepatitis B patients who visited the Hepatitis Association of Hamedan province during 2004-2005 were enrolled. Hepatitis A viru...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023